*实验室*

Lab & Experiment
您的位置:主页 > *实验室* > 实验操作 >

液相制备TIPs

发布日期:2019-11-12 16:16 来源:研究小组 作者:AgroIPM 浏览次数:

1.制备谱图中峰的分叉原因和处理办法

  峰分叉又称为裂峰,有可能是色谱柱以外的色谱条件发生了变化,或者色谱柱本身受损发生了变化。
A、样品浓度较高,上样量较大,导致峰分叉;只需要减少上样量即可。
B、色谱柱柱头被污染引起的峰分叉;使用合适的溶剂冲洗色谱柱。
C、柱压太高致使柱头塌陷引起峰分叉;在柱头端增补填料或者更换新色谱柱。
D、溶解样品的强度比流动相强,溶剂效应引起峰分叉;使用流动相溶解样品即可。
E、固体颗粒堵塞分配器,分配不均匀导致峰分叉;更换柱头端分配器即可。

2.我要单次上样0.5-1g样品,请问我该用什么制备柱?

  建议使用30*250mm或者50*250mm的制备柱。化学药可以按照每100g填料可以上样1g样品的方法进行简单的计算,得到应该使用多大的制备柱或者相应的填料量。多肽样品由于自身的特殊性,纯化同样质量的样品,需要更多的填料。一般认为多肽样品100g填料可以上样0.1g样品。

3.柱子流速和运行压力

  正常情况下,21.2mm色谱柱的最佳流速20mL/min。制备柱流速可以参考下表:

规格 柱管规格(mm)
项目 4.6*250 10*250 21.2*250 30*250 50*250
填料量
(g)
2.5 11.8 53.1 106.3 295.4
放大因子 1 4.73 21.2 42.5 118
上样量
(mg)
0.25-25 1.18-118 5.31-531 10.63-1063 29.54-2954
流速范围
(ml/min)
0.5-2 3-5 10-20 20-45 70-130


 

 

微信扫码 关注我们

  • 24小时咨询热线

    24小时咨询热线

  • 移动电话

Copyright © 2007-2022 AgroIPM. All Rights Reserved 地址:河南省新乡市华兰大道东段 备案号:豫ICP备15013081号-4 网站地图