液相制备TIPs

发布日期：2019-11-12 16:16 来源：研究小组作者：AgroIPM 浏览次数：

1.制备谱图中峰的分叉原因和处理办法

　　峰分叉又称为裂峰，有可能是色谱柱以外的色谱条件发生了变化，或者色谱柱本身受损发生了变化。
A、样品浓度较高，上样量较大，导致峰分叉；只需要减少上样量即可。
B、色谱柱柱头被污染引起的峰分叉；使用合适的溶剂冲洗色谱柱。
C、柱压太高致使柱头塌陷引起峰分叉；在柱头端增补填料或者更换新色谱柱。
D、溶解样品的强度比流动相强，溶剂效应引起峰分叉；使用流动相溶解样品即可。
E、固体颗粒堵塞分配器，分配不均匀导致峰分叉；更换柱头端分配器即可。

2.我要单次上样0.5-1g样品，请问我该用什么制备柱？

　　建议使用30*250mm或者50*250mm的制备柱。化学药可以按照每100g填料可以上样1g样品的方法进行简单的计算，得到应该使用多大的制备柱或者相应的填料量。多肽样品由于自身的特殊性，纯化同样质量的样品，需要更多的填料。一般认为多肽样品100g填料可以上样0.1g样品。

3.柱子流速和运行压力

　　正常情况下，21.2mm色谱柱的最佳流速20mL/min。制备柱流速可以参考下表：

规格	柱管规格（mm）
项目	4.6*250	10*250	21.2*250	30*250	50*250
填料量（g）	2.5	11.8	53.1	106.3	295.4
放大因子	1	4.73	21.2	42.5	118
上样量（mg）	0.25-25	1.18-118	5.31-531	10.63-1063	29.54-2954
流速范围（ml/min）	0.5-2	3-5	10-20	20-45	70-130