管内径影响流动相运行中产生的死体积以及流动过程中样品的扩散,以下几个方面需要加以考虑:
1.系统流路管路的完整性很大程度上取决于管路材料的适用性以及具体应用。管路可由PEEK(聚醚醚酮)高性能工程聚合物材料或不锈钢制成,并且应与样品和流动相化学相容,以防止样品粘附到管路表面,造成样品损失、残留或影响产量。
2.系统管路应能够承受流路的压力和操作温度,尽管纯化色谱通常不会对流路进行温度控制,温度问题并不是很重要。
3.压力限制。色谱纯化系统可分为三个区域 - 溶剂容器与泵之间的“低压”区;泵与色谱柱入口之间的“高压”区;以及位于检测器之后,色谱柱出口与废液容器或馏分收集器之间的第二个“低压”区。每个区域对管路的耐压要求各不相同。如果在耐压要求非常严格的压力区域内使用材料不合适的管路,不仅会影响分离性能和导致色谱问题,还有可能致使管路渗漏和破裂。
4.管路内径和长度。一般来说,管路内径越小,其内部流速越快,样品扩散程度就越低,可使样品尽可能保持集中。但是,随着管路内径减小,管路产生的压力会显著增大,这可能会导致系统背压升高,无法与检测器流通池或其它系统组件兼容。不同内径的管路相连时,接头处或其附近可能会形成死体积。若液流或流动相不能充分流过死体积区域,就会造成峰形问题和残留。关于管路长度,其产生的流路体积越大,样品越容易被流动相稀释,分离的组分也越容易重新合并。管路长度还与系统压力、延迟体积和柱外体积有关。为了避免以上问题,应在不影响功能的前提下尽量缩短管路长度。
大规模制备型纯化系统通常以高流速运行,为了降低高流速引起的高背压,需要在纯化系统中连接内径合适的管路,以确保高质量的色谱结果。您可以选择一系列内径不同的管路,适用流速范围为0.05 mL/min~130 mL/min。
表1:管路内径及其适用流速(mL/min)
“颜色”指PEEK聚合物管路的颜色。
相关链接:液相色谱管路及连接
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