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植物材料粗提取实验-单溶剂粗提取

发布日期:2019-01-08 16:18 来源:研究小组 作者:AgroIPM 浏览次数:
  植物材料粗提取是进行活性植物筛选的第一步,为了确保获得准确的数据,应保证各实验环节样品和数据处理按要求进行。

1   样品的标记

  采集回的样品要进行详细的描述和记录,信息应包括:采集时间、采集地点、采集人、样品名称、采集部位等基本信息。采集后的样品及时进行标记,防止标签脱落,避免样品混淆。

  样品记录可打印“样品采集信息记录表”填写后再录入,录入完毕应分别以手写稿、电子稿和打印稿存档,打印稿后需由存档人签名。

2   样品的前处理

  采集的新鲜植物样品需要作干燥处理,一般在室内晾干,避免采用烘箱烘干,避免阳光直射,以防止在高温和阳光紫外线作用下样品中成分发生改变。晾干后的样品需要粉碎,一般粉碎至40筛目(粒径0.4mm左右)。在考察不同粒径对提取效率的影响时可采用不同规格的标准筛进行过筛,以获得不同的样品。处理后的样品置于干燥阴凉的环境中贮藏,条件充许时可置于冷冻冰箱中贮藏。

3   样品的称量

  样品的提取过程中需要获得提取率数据,以便生测时进行浓度配制,最终分离活性成分时获得含量等相关数据。

  提取率可通过样品提取前后重要或提取物重量进行计算。无论采用哪一种方法进行计算,植物样品在提取前均应称重,供试样品重量高于100g时,可精确到0.1g,样品量较少时应至少精确到0.01g。应注意由于提取过程及称量中的一些误差,(提取前样品的重量-提取后样品的重量)与提取物的重量之间会存在一定的差异。


 
注意:

(1)提取过程中植物样品会有损失,因此,以样品提取前后差值计算提取率会存在较大误差;

(2)提取物在浓缩后形成膏状,较难转移和称量。可提前称量好浓缩瓶重量,待溶剂蒸干后再称量,以差值来计算提取物的重量。

建议以公式2来计算提取率。

4   提取物的浓缩

  提取物在浓缩时参照旋转蒸发仪的使用方法进行。尽量避免浓缩中产生暴沸,避免过滤和转移过程中样品损失。

  当样品需要反复提取时,可将多次浸提液浓缩在一个浓缩瓶中,但应按样品称量中的要求进行称量和计算提取率。需要注意的是,在提取工艺研究中,可能需要考察同一样品重复提取时单次提取的情况,这时就需要对单次提取液分别进行浓缩和称量。

5   提取物的后处理

  提取物一般呈膏状,在转移时应先称取容器的质量,以方便其后取样。每一瓶提取物均有标签标明,在实验记录本上一一对应作好记录和说明。转移过程中需要使用到溶剂,尽量使用易挥发、对后续工作影响较小的溶剂,如丙酮、乙酸乙酯、氯仿等,必要时使用无水乙醇和甲醇洗脱溶解转移。转移后的样品中含有一定的溶剂,可敞口放置于室温下一周左右等待溶剂挥发,也可使用柱形浓缩器将样品瓶放入后用放置蒸发器进行浓缩。处理好的样品瓶口可用橡皮塞封口,再以封口膜封严。

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