*实验室*

Lab & Experiment
您的位置:主页 > *实验室* > 实验操作 >

高氏1号培养基的制备

发布日期:2020-11-16 11:15 来源:研究小组 作者:AgroIPM 浏览次数:
一、目的要求
  通过对高氏1号培养基的制备,掌握配制合成培养基的一般方法。

二、基本原理
  高氏1号培养基是分离和培养放线菌的合成培养基。这种培养基是由可溶性淀粉(作为碳源),KNO3(作为氮源),NaCl、K2HPO4·3H2O、MgSO4·7H2O(作为无机盐,为微生物提供钠、钾、磷、镁、硫等离子)和FeSO4·7H2O(作为微生物的微量元素,提供铁离子)等组成。由于磷酸盐和镁盐相混合时产生沉淀,因此,在混合培养基成分时,一般是按配方的顺序依次溶解各成分。对于象FeSO4·7H2O这样的微量成分,则可预先配成高浓度的贮备液,在配制培养基时按需要加入一定的量。
  高氏1号培养基配方如下:
  可溶性淀粉 20g
  NaCl     0.5g
  KNO3      1g
  K2HPO4·3H2O 0.5g
  MgSO4·7H2O   0.5g
  FeSO4·7H2O   0.01g
  琼脂 15-20g
  水 1000ml
  pH 7.4-7.6

三、器材
  可溶性淀粉,KNO3 ,NaCl,K2HPO4·3H2O,MgSO4·7H2 O, FeSO4·7H2O,琼脂, 1mol/L NaOH, 1mol/ LHCl;
  试管,三角烧瓶,烧杯,量筒,玻棒,培养基分装器,扭力天平,牛角匙,高压蒸汽灭菌锅,pH试纸(pH5.5-9.0),棉花,牛皮纸,记号笔,麻绳,纱布等。

四、操作步骤
  1.称量和溶化
  按配方先称取可溶性淀粉,放入小烧杯中,并用少量冷水将淀粉调成糊状,再加入少于所需水量的沸水中,继续加热,使可溶性淀粉完全溶化。再称取其他各成分依次逐一溶化。对微量成分FeSO4 ·7H2O可先配成高浓度的贮备液后再加入,方法是先在100ml水中加入1g的FeSO4·7H2O配成0.01g/ml,再在1000ml培养基中加入1ml的0.01g/ml的贮备液即可。待所有药品完全溶解后,补充水分到所需的总体积。如要配制固体培养基,加入琼脂后需要煮沸溶解再加入盐,防止盐在加热过程中发生化学反应。
  2.pH调节、分装、包扎、灭菌及无菌检查。

微信扫码 关注我们

  • 24小时咨询热线

    24小时咨询热线

  • 移动电话

Copyright © 2007-2020 AgroIPM. All Rights Reserved 地址:河南省新乡市华兰大道东段 备案号:豫ICP备15013081号-4 网站地图