常压反相柱层析

发布日期：2024-12-04 10:24 来源：网络作者：网络浏览次数：

含有羧基，酚羟基等大极性基团的两个化合物，普通正相柱层析很难分离。反相TLC监测发现分的很开，适合反相柱层析。柱层析操作过程和正相柱层析大同小异。

一、首先在柱子底下铺一层1cm厚的石英砂（也可不加）。

二、装入C18反相硅胶，甲醇润柱，活化硅胶，此步骤必不可少。或者将硅胶与甲醇混成匀浆后倒入柱子。

三、完全润湿硅胶后，上层留少量甲醇（液面与硅胶面齐平），轻轻敲击，使填料上层平整。

四、平整后，将甲醇液面压到硅胶上沿，上层可加入2cm厚的石英砂防止加液时破坏柱面。

五、用过柱体系的水相置换柱子里的溶剂，准备上样。

一般情况下，湿法上样就可以了，最好用水相体系溶解样品进行上样，如果溶解度不好，可以加入少量的有机相促溶。上样后，加入展开剂梯度洗脱，加入溶剂时不要将上层的沙子冲散。
注意事项：由于反相柱的压力比普通的正相柱大很多，整个操作过程要在通风橱中进行，并且加压时将通风橱拉低，安全第一。
梯度洗脱过程中，可以利用正相TLC监测反应，如果爬不起来可以尝试一下EA:AcOH=200:1体系。