革兰氏染色法

发布日期：2014-12-03 15:36 来源：研究小组作者：AgroIPM 浏览次数：

　　革兰氏染色法不仅用来观察细菌的形态，而且它还是细菌鉴定的重要方法，它可将全部细菌区分别革兰氏阳性菌和阴性菌两大类。革兰氏染色法的步骤为：涂片→固定→结晶紫色染色→水洗→碘液媒染→水洗→酒精脱色→番红复染→水洗→干燥→观察。
　　涂片与单染色法相同。
　　固定与单染色法相同。
　　结晶紫染色染色1分钟，然后水洗并用吸水纸吸干。
　　碘液媒染染色1分钟，然后水洗并吸干。
　　酒精脱色用95%酒精脱色，直到酒精不出现紫色时即停止（大约半分钟），然后立即水洗，并吸干。
　　番红复染染色3分钟左右，然后水洗并吸干。
　　镜检在显微镜油镜头下观察，菌体显蓝紫色的为革兰氏阳性菌；菌体显红色的为革兰氏阴性菌。

革兰氏染色判读
（1）革兰氏阳性 : 深蓝色。
（2）革兰氏阴性 : 粉红色或红色。
（3）革兰氏变异性 : 部分为革兰氏阳性反应细胞¸部分为革兰氏阴性细胞。
（4）革兰氏中性 : 同时无法染上结晶紫与复染。

染色结果

革兰氏染色剂
1、草酸铵结晶紫
甲液：结晶紫2克，95%酒精20毫升。
乙液：草酸铵0.8克，蒸馏水80毫升。
两液分配成后混合
2、鲁戈尔（Lugol）碘液
碘 1克，碘化钾 2克，蒸馏水 300毫升
碘和碘化钾在研钵中充分研磨，溶于水中，贮放在茶色磨口玻璃瓶中。
3、复染剂（藏红〇）
藏红○(2.5%的95%酒精溶液) 10毫升
蒸馏水100毫升

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