TLC选择洗脱剂比例

发布日期：2011-10-26 16:20 来源：研究小组作者：admin 浏览次数：

　　TLC的一个重要的作用就是为层析时选择合适的洗脱体系，和合适的洗脱比例。一般来讲，如果要将TLC中合适的洗脱比例用于柱层析时，一般应该适当减小洗脱强度，所以所谓降低30～50％，是有道理的。如何降低了，当然一般是调节洗脱液的比例，在使用TLC时，一般来讲，是很少用一元体系来展开，特别是对于成分较为复杂的化合物，几乎是不可能。

　　通常一个展开体系，包括由两部分组成。
　　第一部分：基本展开体系（包括极性大的试剂，极性较小的试剂。其中，极性较小的部分一般起到分离的作用，极性较大的试剂一般起到帮助化合物在薄层上移动，对分离物质的洗脱能力较强，可以提高比移植，但不能提高分辨率。
　　第二部分：展开剂中加入酸或碱，主要是抑止某些酸或碱性物质而产生斑点的拖尾。
　　因此，调节基本展开体系溶剂的比例就可以调节溶剂的极性，换言之，就是增大小的比例，或减小大的比例。

　　混合溶剂的溶剂强度与组成溶剂所占的体积比相关，可通过介电常数或其它常数来计算。柱层析时还是以配制后用TLC验证Rf值为好，分离斑点之间Rf值相差较大时，将Rf值调节在0.2左右，梯度洗脱；斑点相距较近或呈念珠状相连时，将主要斑点Rf值调至0.15至0.2之间为好。Rf值太小，柱上洗脱时间较长，谱带扩散较严重；Rf值太大，洗脱平衡不充分，也难于分开。斑点的洗脱体积与其Rf值有近似倒数的关系，Rf为0.1时，需10个保留体积来洗脱；Rf为0.3时，需3个保留体积洗脱；一般斑点在7或8个保留体积洗脱时（即Rf值在0.15至0.2之间），效果最好。