1.分离用原材料:原料要足够多,根据资料查阅看预分离成分的含量。充分估计分离过程中的损失,保证最终拿到的化合物具备足够的量进行后续工作(结构鉴定、活性测定、衍生合成等)。
2.试剂:分离过程中需要用到大量的有机试剂,常用的有石油醚、乙酸乙酯、氯仿、丙酮、甲醇等。以上提到的试剂为常规试剂,根据TLC的情况可以考虑选择其它的试剂进行配比。准备足够多的试剂备用,不要上柱子了等试剂。
3.填料:填料一般从最便宜的开始用,硅胶、酰胺树酯性价比都比较高。先用这些填料进行粗分,到后面用Sephedax、C18等填料进行细分。
4.层析柱:层析柱规格很多。为了提高分离效率,要选择柱效高的层析柱,这就要求柱子粗而长。但是实际使用中,一般难以达到这样的要求。从普遍情况来看,粗一些的柱子有助于提高分离效率。
5.馏分与浓缩:每个馏分的多少不一定,根据色带的情况、柱子大小及分离的精细程度确定。情况允许时尽量一个馏份做一份浓缩,然后再做TLC分析,否则很容易造成馏分混合,必需再次分离。
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