游雪娇, 李良秋, 马连营, 彭斐元. 激光共聚焦扫描显微镜在抗菌机理研究中的应用[J]. 微生物学通报, 2015, 42(6): 1108-1121.
YOU Xue-Jiao, LI Liang-Qiu, MA Lian-Ying, PENG Fei-Yuan. Applications of confocal laser scanning microscope in the research of antimicrobial mechanism[J]. Microbiology China, 2015, 42(6): 1108-1121.
激光共聚焦扫描显微镜在抗菌机理研究中的应用
游雪娇,
李良秋 
,
马连营,
彭斐元
摘要: 激光共聚焦扫描显微镜采用激光光源、共聚焦技术和点扫描技术，使其分辨力较传统光学显微镜大为提高。与其他的生物学技术相配合，可定性、定量、定位地检测组织细胞内的多种生化成分。它具有的活细胞动态监测、断层扫描及三维图像重建等功能，使其在抗菌机理研究、尤其是抗生物膜研究中得到大量的应用。本文就激光共聚焦扫描显微镜在抗菌剂作用位点，抗菌剂对微生物细胞膜，微生物生理代谢，以及微生物生物膜形成与结构的影响等研究中的应用做一综述。
关键词: 激光共聚焦扫描显微镜 抗菌 机理 生物膜
Applications of confocal laser scanning microscope in the research of antimicrobial mechanism
YOU Xue-Jiao,
LI Liang-Qiu ,
MA Lian-Ying,
PENG Fei-Yuan
Abstract:Confocal laser scanning microscope (CLSM or LSCM) offers higher resolution than traditional optical microscopy due to use of laser illumination source, pinhole spatial filter and point scanning technology. In combination with other biological technologies, CLSM enables the qualitative and quantitative characterization of various biochemical ingredient in situ. As CLSM is a valuable tool for observing living cells, obtaining scan-images of thick specimens at various depths and three-dimensional reconstructions, it has great application in the research of antimicrobial and anti-biofilm. This paper concerns the applications of CLSM in the cellular distribution of microbicides and its effect on cell membrane, metabolic pathways, as well as the formation and structure of biofilm.
Key words: Confocal laser scanning microscope Antimicrobial Mechanism Biofilm
自然界的有害细菌、真菌和病毒等微生物是使人类遭受传染、诱发疾病的主要原因。杀灭或是抑制微生物(包括细菌、真菌、衣原体、立克次体、病毒甚至原生动物)的抗菌剂种类多达数百上千种。不同的抗菌剂对同一种病原菌有不同的抗菌作用机理和有效性，同一种抗菌剂对于不同的病原菌也有不同的抗菌作用机制和抑制范围。因此，全面、深层次的抗菌机理研究对进一步改善抗菌剂的有效性，研究出长效广谱、高效安全的抗菌剂有着重要的意义。
激光共聚焦扫描显微镜(Confocal laser scanning microscope，CLSM or LSCM)是20世纪80年代发展起来的一种现代化的光学显微镜。与普通光学显微镜不同的是：CLSM以单色性非常好的激光作为光源，采用共聚焦技术消除了透镜的色差和球差，并运用点扫描技术，使标本上每一点的图像避免了相邻点的衍射光和散射光的干扰，从而使显微镜的分辨力得以提高。辅以各类荧光探针或荧光染料与被测物质特异性结合，用激光激发荧光探针或荧光染料，扫描得到高分辨率、高对比度的荧光图像，从而定性、定量、定位地检测组织细胞内的多种生化成分。在抗菌机理研究中，CLSM已被广泛应用于细胞膜结构与通透性、细胞的生理代谢、抗菌剂作用位点以及生物膜形成与结构等多方面的研究中。
