利用Prep150 LC系统分离紫锥菊提取物中的天然产物
发布日期：2019-11-10 22:05 浏览次数：
来自于Waters官方的一篇文章，从中探索制备液相使用的一般方法。
Prep150液相制备系统
1.样品的制备
将总计5.3 g的紫锥菊粉末分别加入两个50 mL的离心管内（各含2.66 g与2.64 g紫锥菊粉末），使用20 mL 70:30的甲醇/水溶液震荡约3 h进行提取中（醇水混合液具有更好的提取性能，具体依据待分离的化合物）。然后对离心管执行离心操作，取上清液，使用多个13 mm GHP Acrodisk注射器过滤器进行过滤（离心和过滤能有效地除去杂质，该步操作对于保护色谱柱具有决定性的作用）。旋蒸除去提取物中的甲醇，直至形成黄褐色胶状物（除去提取溶剂有助于提高色谱谱图质量）。将此胶状物溶于14 mL 95:5的水/乙腈溶液中（采用初始流动相溶解样品）。
2.样品的HPLC分析
HPLC分析探索流动相的使用情况。如图示，在很短时间内完成了样品的检测。检测时间取决于提取物的复杂程度，也取决于采用的色谱柱。（此例中选用了较短的分析型色谱柱，短色谱柱可以采用大进样量、高流速及快速获得结果。)
实验中对于进样量进行了探索（分别进样20μl和35μl），可以为制备分离提供一些参考。
3.放大制备
利用ChromScope软件中集成的Prep Calculator(制备计算器)工具，将流速与进样体积从分析柱几何放大至制备柱，所得制备级色谱图具有较好的分离程度（见下图）。
