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革兰氏染色法

发布日期:2014-12-03 15:36 浏览次数:

  革兰氏染色法不仅用来观察细菌的形态,而且它还是细菌鉴定的重要方法,它可将全部细菌区分别革兰氏阳性菌和阴性菌两大类。革兰氏染色法的步骤为:涂片→固定→结晶紫色染色→水洗→碘液媒染→水洗→酒精脱色→番红复染→水洗→干燥→观察。
  涂片 与单染色法相同。
  固定 与单染色法相同。
  结晶紫染色 染色1分钟,然后水洗并用吸水纸吸干。
  碘液媒染 染色1分钟,然后水洗并吸干。
  酒精脱色 用95%酒精脱色,直到酒精不出现紫色时即停止(大约半分钟),然后立即水洗,并吸干。
  番红复染 染色3分钟左右,然后水洗并吸干。
  镜检 在显微镜油镜头下观察,菌体显蓝紫色的为革兰氏阳性菌;菌体显红色的为革兰氏阴性菌。
 
革兰氏染色判读
(1)革兰氏阳性 : 深蓝色。
(2)革兰氏阴性 : 粉红色或红色。
(3)革兰氏变异性 : 部分为革兰氏阳性反应细胞¸部分为革兰氏阴性细胞。
(4)革兰氏中性 : 同时无法染上结晶紫与复染。

染色结果
 

革兰氏染色剂
1、草酸铵结晶紫
甲液:结晶紫2克,95%酒精20毫升。
乙液:草酸铵0.8克,蒸馏水80毫升。
两液分配成后混合
2、鲁戈尔(Lugol)碘液
碘 1克,碘化钾 2克,蒸馏水 300毫升
碘和碘化钾在研钵中充分研磨,溶于水中,贮放在茶色磨口玻璃瓶中。
3、复染剂(藏红〇)
藏红○(2.5%的95%酒精溶液)   10毫升
蒸馏水100毫升

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