真菌保存方法——滤纸片法保存

一、材料
菌株、滤纸、培养皿（灭菌）、镊子、菌种保存管（灭菌）、（滤纸）打孔器

二、方法步骤

1.圆形滤纸片的制备
用（滤纸）打孔器将滤纸制备成直径为5mm的圆形滤纸片，放入培养皿中，高压灭菌备用。

2.菌种活化
用镊子（在酒精灯上灭菌）将灭菌的滤纸片贴在含有培养基的平板上（离皿中心约2/3处），注意一定要单张滤纸片放置，可以放置一圈，待滤纸片放置完毕后，再将至少培养一代的菌株转接在该平板上中央，置于25℃恒温培养箱中培养。以下为示意图。



3.菌种干化
在培养3～5 d后，菌种菌落生长覆盖过滤纸片，此时培养即可停止。用镊子（在酒精灯上灭菌）将培养皿中的滤纸片揭起来放在另一个灭过菌的干燥培养皿中，分开放置使菌碟不至于粘在一起，然后再培养皿盖子上做标记，用保鲜膜（或ParaFilm）将培养皿包起来，放在室温下自然干燥晾干。

4.菌种保存
放置大约一周左右，待含有真菌的滤纸片晾干时，用镊子（在酒精灯上杀菌）将滤纸片放在菌种保存管（灭菌）中，在保存管上注明菌种名称放于4℃条件下保存即可。

注意：不同菌株之间使用镊子一定要在酒精灯上杀菌，避免菌株之间出现交叉污染。