高速逆流色谱技术

　　高速逆流色谱 （ high-speed countercurrent chromatography ， HSCCC ）是 20 世纪 80 年代发展起来的一种连续高效的液—液分配色谱分离技术， 它不用任何固态的支撑物或载体。 它利用两相溶剂体系在高速旋转的螺旋管内建立起一种特殊的单向性流体动力学平衡，当其中一相作为固定相，另一相作为流动相，在连续洗脱的过程中能保留大量 固定相。

　　由于不需要固体支撑体，物质的分离依据其在两相中分配系数的不同而实现，因而避免了因不可逆吸附而引起的样品损失、失活、变性 等，不仅使样品能够全部回收，回收的样品更能反映其本来的特性，特别适合于天然生物活性成分的分离。而且由于被分离物质与液态固定相之间能够充分接触，使 得样品的制备量大大提高，是一种理想的制备分离手段。

　　它相对于传统的固—液柱色谱技术，具有适用范围广、操作灵活、高效、快速、制备量大、费用低等优点。目前 HSCCC 技术正在发展成为一种备受关注的新型分离纯化技术，已经广泛应用于生物医药、天然产物、食品和化妆品等领域， 特别在天然产物行业中已被认为是一种有效的新型分离技 术；适合于中小分子类物质的分离纯化。

　　我国是继美国、日本之后最早开展逆流色谱应用的国家，俄罗斯、法国、英国、瑞士等国也都开展了此项研究。美国 FDA 及世界卫生组织（ WHO ）都引用此项技术作为抗生素成分的分离检定， 90 年代以来，高速逆流色谱被广泛地应用于天然药物成分的分离制备和分析检定中。

逆流色谱原理：

1.　逆流色谱是20世纪50年代源于多极萃取技术（非连续性）

　　但是多极萃取设备庞大复杂、易碎、溶剂体系容易乳化，溶剂耗量大，分离时间长。

2.　20世纪70年代，出现了液滴逆流色谱（DCCC）

特点：（1）流体静力学原理（Hydrostatic equilibrium system，HSES）
　　　（2）分离时间过长、连接处容易出现渗漏等

3.20世纪70年代出现了离心分配色谱仪（Centrifugal partition chromatography，CPC）

特点： （1）基于流体静力学原理（Hydrostatic equilibrium system，HSES），利用公转产生的单一力场
　　　（2） 连接处较多而且容易出现渗漏，清洗维护复杂

4．20世纪80年开始出现了现在的高速逆流色谱，可称为最先进的逆流色谱
特点：（1） 基于流体动力学原理（Hydrodynamic equilibrium system，HDES）

　 （2） 通过公转、自转（同步行星式运动）产生的二维力场，保留两相中的其中一相作为固定相

（3）通过高速旋转提高两相溶剂的萃取频率，1000rpm旋转时可达到17次/s频率的萃取过程。

5.HSCCC分离流程图

应用领域：  

（ 1 ）天然产物已知有效成分的分离纯化
（ 2 ）化学合成物质的分离纯化
（ 3 ）中药一类、五类新药的开发
（ 4 ）中药指纹图谱和质量控制研究
（ 5 ）抗生素的分离纯化
（ 6 ）天然产物未知有效成分的分离纯化（新化合物开发）
（ 7 ）海洋生物活性成分的分离纯化
（ 8 ）放射性同位素分离
（ 9 ）多肽和蛋白质等生物大分子分离以及手性分离等