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石蜡切片及染色过程

时间:2019-08-16 10:53
来源:研究小组
作者:AgroIPM
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内容介绍

石蜡切片是最基本的切片技术,冰冻切片和超薄切片等都是在石蜡切片基础上发展起来的。苏木素与伊红对比染色法(简称 H.E.对染法)是组织切片最常用的染色方法。

 

这种方法适用范围广泛,对组织细胞的各种成分都可着色,便于全面观察组织构造,而且适用于各种固定液固定的材料,染色后不易褪色可长期保存。

 

经过HE染色,细胞核被苏木素染成蓝紫色,细胞质被伊红染色呈粉红色。

 

 

实验步骤及注意事项

 

一、 石蜡切片

 

1.  取材: 刀片要求锋利而薄,组织厚度约 2—3mm, 大小 1.5×1.5×0.2~0.3cm 为宜. 取材时间越快越好.

 

2.  固定: 组织取下后应立即放入 10%福尔马林(相当于 4%甲醛)固定.

 

注意:

 

(1). 固定液量应为组织块体积的 40 倍.

 

(2) 固定时间固定时间与使用的固定液种类和组织块大小, 温度等有关. 一般为 3—24h.

 

(3)固定温度大多可在室温固定, 在低温(4℃)时间应延长.

 

(4)固定容器应大些.

 

3.  漂洗: 流水冲洗 2—10h.

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