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细菌冷冻真空干燥保存法

时间:2017-07-08 11:50
来源:研究小组
作者:admin
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内容介绍
该法是目前保存菌种的最佳方法,具有如下几个突出的优点:
①适用范围广。除少数不产生孢子只产生菌丝体的丝状真菌不宜采用此方法保藏外,其他各大类微生物如细菌、放线菌、酵母菌、丝状真菌及病毒均可采用此方法保藏;
②保藏期长,成活率高。有人报道保藏在真空冷冻干燥安培管中的真菌成活期长达40多年,一般微生物至少可保存10余年;
③微生物在保藏期内可避免其它杂菌污染;
④便于携带运输,易实现商品化生产。
其缺点为需要一定的设备(冷冻真空干燥机)、操作繁琐等。菌种管由传统的玻璃菌种管改为0.5ml带盖塑料离心管(也可采用专用的冻存管)。
 
方法:
①将塑料离心管置耐高压塑料离心管盒内并用双层报纸包好,高压蒸汽15磅15min消毒,放烘箱80℃烘干水蒸汽。
②在净化工作台内用脱脂牛奶洗下浓菌悬液,再用滴管加到离心管底部,每只0.2ml左右,切记不要将牛奶接触离心管口
③将加好菌液的离心管盒置-20℃冰箱预冻(也可超低温速冻),预冻好后把离心管盒放置到冷冻干燥机冻干
④冻干后的离心管在净化工作台内压紧管盖。贴标签,再用封口膜(parafilm)封紧管口。放-20℃或更低温冰箱保存。

脱脂牛奶灭菌:购买袋装或盒装的超高温灭菌优质脱脂牛奶直接使用,或在115℃处理25min高压蒸汽灭菌。

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