河南科技学院胡林峰研究小组欢迎您的访问!

细菌的滤纸片保藏法

时间:2017-07-08 11:24
来源:研究小组
作者:AgroIPM
浏览次数:
内容介绍
一、滤纸片的准备
     用打孔器将滤纸制成直径约3mm的圆形小纸片,放入普通玻璃小瓶中,121°C高压灭菌30分钟后备用。
 
二、菌种的准备
     将需要保存的菌种,在适宜的斜面培养基或平板培养基上培养,使其充分生长。
 
三、菌种保存
 
(一)抽真空方法
(1)取灭菌脱脂牛乳1-2ml滴加在灭菌培养皿或试管内,挑取数环菌苔在牛乳内混匀,制成浓悬液。
(2)用灭菌镊子夹住高压灭菌后的滤纸片浸入菌悬液内,使其自然吸饱,小心放入灭菌后的菌种保存玻璃瓶内,每瓶至少放置10片,然后盖上瓶盖(注意留有小缝隙,不要盖紧)。
(3)在玻璃瓶外壁上注明菌种编号、种类、名称、保存时间等信息。
(4)将玻璃瓶放入内有五氧化二磷作吸水剂的干燥器中,用真空泵抽气至干(如果没有干燥器,也可直接抽气至干)。
(5)将干燥后的装有菌片的玻璃瓶放置于-20°C及以下低温冰箱冷冻保存。
     上述滤纸片保存法需要抽真空,如果实验室不具备抽真空的条件,用如下方法。
 
(二)无需抽真空方法
(1)用无菌小镊子夹住滤纸片,每片在细菌平板上刮取菌苔,或至少刮取3-5个单菌落,然后将滤纸片放入菌种保存玻璃瓶内,每瓶至少放置10片,然后直接盖紧瓶盖。
(2)在玻璃瓶外壁上注明菌种编号、种类、名称、保存时间等信息。
(3)将干燥后的装有菌片的玻璃瓶放置于-20°C及以下低温冰箱冷冻保存。
 
四、菌种复苏
     需要复苏使用菌种时,从菌种保存玻璃瓶中取出1-2片滤纸片,用少量生理盐水浸泡后,划线接种于适宜的固体培养上;或直接将滤纸片放入适宜的液体培养基内,置培养箱中培养。
 
热点内容